Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych ad 5

Komórki myszy WBB6F1-KitW / KitW-v (W / Wv) lub WT WBB6F1 + / + z niedoborem komórek tucznych immunizowano zgodnie z naszym standardowym protokołem i oceniano pod kątem natychmiastowej reakcji nadwrażliwości na prowokację alergenem według 3 kryteriów: objawy kliniczne, maszt degranulacja komórkowa i wysięk osocza (Figura 5). Myszy W / Wv (pomimo montowania normalnej odpowiedzi IgE) wyraźnie wykazywały znacznie zmniejszoną odpowiedź we wczesnej fazie, niezależnie od monitorowanego kryterium (Figura 5A). Indukcja każdego objawu była podobnie upośledzona u myszy W / Wv, co potwierdza pogląd, że każde z tych kryteriów okulistycznych jest dobrymi wskaźnikami funkcji komórek tucznych (Figura 5B). Analiza histologiczna wyraźnie wykazała, że komórki tuczne ulegają anafilaksji. degranulacja u myszy WBB6F1 + / +, podczas gdy nie wykryto żadnych komórek tucznych w spojówkach myszy W / Wv (dane nie pokazane). Pomimo braku komórek tucznych w spojówkach myszy W / W prowokowanych alergenem, zarówno eozynofilowe odpowiedzi późnej fazy jak i neutrofilowe pozostały nienaruszone u tych zwierząt (dane nie pokazane). Ostatecznie wynaczynienie barwnikiem błękitu Evansa zastosowano do oceny wysięku osocza w odpowiedzi na alergen (Figura 5C). Podejście alergenu myszy WBB6F1 + / + wykazuje 6-krotny wzrost wynaczynienia błękitem Evansa w porównaniu do myszy immunizowanych pozornie, podczas gdy praktycznie nie zaobserwowano wynaczynienia po prowokacji alergenem myszy W / Wv. Podsumowując, dane te potwierdzają pogląd, że odpowiedź wczesnej fazy w tym modelu jest silnie uzależniona od komórek tucznych. Sugeruje to również, że upośledzona odpowiedź wczesnej fazy u myszy z niedoborem MIP-1. Jest prawdopodobnie widoczna z powodu działania na masztową komórkę spojówkową. Wniosek ten jest poparty przez wirtualny brak bazofilów w spojrzeniu na alergen, jak określono za pomocą analizy mikroskopowej elektronowej (dane nie pokazane). Figura 5 Wyniki kliniczne są zmniejszone, a natychmiastowe reakcje nadwrażliwości upośledzone u myszy W / Wv z niedoborem komórek tucznych. (A) Wyniki kliniczne były znacząco tłumione u myszy W / Wv w porównaniu z myszami WT kompetentnymi dla mastocytów (n = 20 na grupę, P <0,05). (B) Każdy symptom kliniczny, obejmujący łzawienie, zaczerwienienie spojówek, obrzęk powiek i obrzęk spojówkowy również został stłumiony u myszy W / Wv. (C) Wynaczynienie barwnika błękitem Evansa 90 minut po prowokacji alergenem oceniano u myszy W / Wv i WT. Myszy W / W wykazują minimalne wynaczynienie barwnika, podczas gdy myszy WT wykazywały znaczący wzrost wynaczynienia w odpowiedzi na prowokację alergenem (n = 8 na grupę, P <0,05). Wartości są wyrażone jako średnie. SEM. Aby dalej badać MIP-1. wkład do fazy efektorowej, uczulone myszy A / J traktowano układowo neutralizującym przeciwciałem specyficznym dla MIP-1 .. Grupy myszy wybrano losowo do leczenia neutralizującym MIP-1. przeciwciało lub kontrolna IgG poprzez wstrzyknięcie dożylne godzinę przed wystąpieniem alergenu. Zgodnie z danymi uzyskanymi z zastosowaniem myszy z niedoborem MIP-1 ., natychmiastowa reakcja nadwrażliwości została znacznie zmniejszona przez neutralizację MIP-1. leczenie przeciwciałem. Dane na Figurze 6A pokazują, że złożony wynik kliniczny jest zmniejszony u myszy otrzymujących neutralizujące przeciwciało. Ponadto, każdy standardowy obraz okulistyczny. w przypadku obrzęku spojówek, obrzęku powiek, obrzęku spojówek i łzawienia. było zmniejszone u myszy leczonych przeciwciałem (Figura 6B). Liczba zdegradowanych komórek tucznych u tych myszy również była znacznie zmniejszona (Figura 6C). Zgodnie z danymi przedstawionymi na Figurze 5, seria eksperymentów również wykazuje, że odpowiedź w tym modelu zależy od komórek tucznych i że nasze kryteria oceny objawów klinicznych dobrze korelują z degranulacją komórek tucznych (analiza korelacji Spearmana, P <0,001) ( Figura 6E). Od MIP-1. blokada może również wpływać na naprowadzanie komórek tucznych (Figura 2), oceniano również procent degranulacji komórek tucznych w tych grupach (obliczonych jako degranulowana liczba komórek tucznych / całkowita liczba komórek tucznych x 100). Procent degranulacji komórek tucznych wynosił 35%. 3% dla grupy Fel d1 / IgG i 17%. 2% dla grupy PBS / IgG. MIP-1. leczenie przeciwciałem znacząco tłumiło wskaźnik degranulacji komórek tucznych (17% . 3% dla grupy Fel d1 / antyA MIP-1 (3). Figura 6 Neutralizacja in vivo MIP-1. hamuje aktywację komórek tucznych i objawy kliniczne w spojrzeniu na alergen. (A) Tłumienie bezpośredniej nadwrażliwości wywołanej alergenem przez anty-MIP-1. leczenie przeciwciałem. Myszom zagłębionym w celu natychmiastowej reakcji nadwrażliwości podano anty-MIP-1. przeciwciało monoklonalne (30 .g / zastrzyk) dożylnie na godzinę przed prowokacją alergenem. Wyniki kliniczne ocenione w 3. dniu uległy znacznemu zmniejszeniu (n = 12 na grupę, P <0,05) [przypisy: wkładka jaydess, hydrominum skutki uboczne, piramida żywieniowa dla dzieci ] [hasła pokrewne: medispirant żel pod prysznic opinie, femoston mini, wkładka jaydess ]