Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych ad

Doświadczenia pasywnej sensytyzacji z zastosowaniem komórek tucznych ex vivo i komórek RBL-2H3 pozytywnych względem CCR1 pokazują bezpośrednio, że MIP-1. służy jako sygnał do stymulacji degranulacji komórek tucznych. Wyniki Nasze obecne rozumienie aktywacji komórek tucznych wynika w dużej mierze z badań wykorzystujących komórki mastocytów (14) wytwarzane in vitro, komórki szpiczaka (14) lub linie komórek tucznych, głównie komórki RBL-2H3. Badania ex vivo lub natywnych komórek tucznych były bardziej ograniczone i zostały ograniczone do tych oczyszczonych z niewielkiej liczby tkanek, takich jak skóra i płuca (15). Podczas gdy badania te dostarczyły niezwykle szczegółowy obraz wymagań aktywacji komórek tucznych i transdukcji sygnału, niektóre aspekty aktywacji komórek tucznych in vivo mogą być nieobecne na tym obrazie. Wariancja danych uzyskanych z takich badań ex vivo z badaniami komórek tucznych in vivo może odzwierciedlać sztuczną naturę linii wytwarzanych in vitro lub hodowanych linii komórek tucznych lub badania mogą po prostu nie rekapitulować fenotypów końcowych i / lub lub lokalne wpływy unieruchomionych tkankowych komórek tucznych in vivo. Rzeczywiście, obecnie istnieją przytłaczające dowody na to, że komórki tuczne znajdujące się w różnych tkankach błony śluzowej są heterogeniczne w odniesieniu do ich profili molekularnych i wymagań aktywacyjnych. Dlatego ważne jest, aby badania były również prowadzone na aktywacji komórek tucznych w nienaruszonych organizmach. Wcześniej opracowaliśmy mysi model alergicznego zapalenia spojówek w celu zbadania roli chemokin w aktywacji komórek tucznych in vivo (16). W tym modelu bezpośrednia reakcja nadwrażliwości jest obserwowana w ciągu pierwszej godziny po prowokacji alergenem. Ponieważ reakcja późnej fazy występuje wiele godzin po ostrej odpowiedzi, jesteśmy w stanie badać aktywację komórek tucznych i ostrą chorobę w tej tkance w całkowitej izolacji od reakcji późnej fazy. W szczególności zbadaliśmy kinetykę rekrutacji komórek zapalnych w tym modelu, a te komórki nie pojawiają się w spojówce przez kilka godzin po szczycie objawów klinicznych w reakcji ostrej fazy. Korzystając z tego systemu, przeszukaliśmy geny eksprymowane wcześnie po prowokacji alergenem za pomocą profilowania genów (16, 17). Stwierdzono, że wiele genów odpowiedzi natychmiastowej jest indukowanych po prowokacji alergenem; Skupiliśmy nasze zainteresowanie najpierw na chemokinach CC, w świetle doniesień o ekspresji receptora chemokin na efektorowych komórkach tucznych. Obecność receptorów dla tych chemokin na komórkach tucznych natychmiast zasugerowała, że indukowana ekspresja chemokin, które obserwowaliśmy, może indukować fizjologicznie istotną sygnalizację z receptorów. W naszym modelu wykryliśmy szybką indukcję MIP-1. transkrypty w ciągu pierwszych 30 minut po ekspozycji na alergen (rysunek 1A) (16). Poziomy MIP-1. osiągnęła maksimum w 3 godziny po prowokacji, a następnie spadła po 24 godzinach. Zwiększone poziomy MIP-1. mRNA po prowokacji alergenem przełożyło się na znaczący wzrost poziomu jego produktu genu. Kiedy mierzyliśmy MIP-1. poziomy białka w homogenatach spojówkowych przy użyciu specyficznego testu ELISA, znacząca indukcja całkowitej MIP-1. białko obserwowano w homogenatach spojówkowych (MIP-1 p po wywołaniu Felis domesticus allergen [Fel d1]: 1,3. 0,3 pg / oko, po prowokacji PBS: 0,2. 0,1 pg / oko, P <0,05). Szybka kinetyka indukcji ekspresji chemokin była zgodna z obserwowaną w drogach oddechowych i skórze. Ta indukcja nie była zależna od konkretnych alergenów, ponieważ obserwowaliśmy tę samą indukcję z użyciem innych alergenów, takich jak krótki ambrozja (17). Figura Lokalizacja komórek eksprymujących MIP-1 (3 w spojrzeniu alergizowanym. (A) Lokalizacja MIP-1. komórki mRNA-dodatnie w spojrzeniu na alergen. Skrawki eksponowano przez 4 dni, wywoływano i barwiono kontrastowo barwieniem H & E. (B) Schematyczny opis rozmieszczenia komórek tucznych spojówek. Należy zwrócić uwagę na kolokalizację z dodatnim rozkładem komórek MIP-1 ., jak pokazano w A. (C) MIP-1. Komórki mRNA-dodatnie zostały również pokazane w obszarze spojówkowym spojówki myszy prowokowanych alergenem (ekspozycja trwająca 3 tygodnie). (D) Pozytywne komórki MIP-1 (3 w spojrzeniu prowokowanym PBS (ekspozycja trwająca 3 tygodnie). Ep, nabłonek spojówki; M, gruczoł Meiboma. Powiększenie, × 40 (A), × 200 (C i D). Następnie przeprowadziliśmy eksperymenty, aby zlokalizować komórki wytwarzające MIP-1. po prowokacji alergenem i ich związku przestrzennego względem komórek tucznych spojówkowych (Figura 1A). Jest już dobrze znane, że tkanka spojówki ma dużą liczbę komórek tucznych, przekraczającą te w płucach lub skórze. Zaobserwowaliśmy, że koncentryczne komórki spojówki koncentrują się w istocie właściwej korzenia powieki (ryc. 1B) [więcej w: chirurgia plastyczna szczecin, problemy z tarczycą objawy, prostowanie keratynowe cennik ] [hasła pokrewne: chirurgia plastyczna szczecin, zaburzenia psychiczne u dzieci, kawa rozpuszczalna skład ]