Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych cd

Obszar wokół oczodołów wokół nerwu wzrokowego kryje znaczną, ale znacznie mniejszą liczbę komórek tucznych. Aby zbadać charakter komórek wytwarzających MIP-1 (3 i ich zależność przestrzenną od komórek tucznych, przeprowadziliśmy analizę hybrydyzacji in situ MIP-1. ekspresja genów na seryjnych odcinkach biopsji spojówkowych wraz z analizą histologiczną / morfologiczną komórek składowych (16, 18). Sygnał dodatni MIP-1 (3 pozytywny był zlokalizowany głównie w komórkach jednojądrzastych w obrębie istoty właściwej korzenia powieki (Figura 1A) w bliskim sąsiedztwie rezydentnych komórek tucznych. Co zaskakujące, nie wykryliśmy MIP-1. transkrypty w innych komórkach (np. komórkach śródbłonka), o których wiadomo, że wytwarzają chemokiny w innych stanach zapalnych tkanek. Komórki produkujące chemokiny w naszym systemie są prawdopodobnie analogiczne do komórek CD68 + uważanych za źródło indukowanej przez alergen produkcji chemokin w płucach. Nie możemy wykluczyć, że inne typy komórek w spojówce mogą również wyrażać niższe poziomy chemokin wywołanych alergenem lub że mogą ekspresjonować chemokiny później w reakcji ostrej fazy. Jednak z naszych eksperymentów wynika, że dominujące źródło indukowalnej MIP-1. transkrypty były komórkami jednojądrzastymi w istocie właściwej. Miejscowe jednojądrzaste komórki w tym regionie, zawierające CD68 + makrofagi i monocyty, były głównymi źródłami MIP-1. podczas reakcji ostrej fazy. Myszy traktowane PBS wykazały konstytutywną ekspresję MIP-1. Bardzo niskiego poziomu. mRNA w komórkach jednojądrzastych będących rezydentami (Figura 1, A, C i D). W reakcji późnej fazy (ponad 6 godzin po prowokacji) podzbiory nowo rekrutowanych eozynofilów zostały zidentyfikowane jako pozytywne dla MIP-1. wyrażenie. Jest to zgodne z faktem, że ludzkie eozynofile mogą wyrażać MIP-1. (19). Znacznie słabsza ekspresja MIP-1. obserwowano również w spojówce zeszpikowej. Ponownie, komórki tuczne znaleziono w pobliżu komórek jednojądrzastych MIP-1 (3 + w tym podregionie spojówki. Stwierdzenie, że MIP-1. ekspresja jest indukowana po ekspozycji na alergen na komórkach jednojądrzastych, zlokalizowanych w pobliżu komórek tucznych sugeruje, że nowo syntetyzowany MIP-1. może wiązać się z pobliskimi komórkami tucznymi CCR1 +. Nasza analiza ekspresji receptora chemokin na komórkach tucznych spojówek wskazuje, że te komórki eksprymują CCR1 (Figura 2, A i B). Stosunek dodatnich komórek do całkowitych komórek tucznych wynosił w przybliżeniu 1:10, co odpowiada stosunkowi zdekranulowanych komórek tucznych obserwowanych w tych doświadczeniach (Figura 2C). Nie obserwowaliśmy ekspresji CCR5 mysich komórek spojówkowych. Od kiedy laboratorium Grant już pokazało, że MIP-1. może głęboko stymulować aktywację komórek tucznych in vitro (20), nasze badania mapowania sugerują, że sygnalizacja z CCR1 może również odgrywać ważną rolę w degranulacji komórek tucznych in vivo. Figura 2 Komórki masztowe spojówkowe eksprymują CCR1 i odpowiadają na rekombinowane MIP-1 .. (A) Komórki tuczne spojówki z naiwnego mysiego plamki pozytywnej dla CCR1. (B) Barwienie błękitem toluidynowym komórek tucznych w części seryjnej. Komórki tuczne CCR1 + są oznaczone gwiazdkami w A. (C). Podskorowy wstrzyknięcie rekombinowanego MIP-1. powoduje chemotaksję komórek tucznych w spojówce u myszy naiwnych. Statystycznie istotne podniesienie całkowitej liczby komórek tucznych we wstrzykniętej MIP-1 w porównaniu z eotaksyną-1. lub kontrole wstrzyknięte pozornie (4 godziny po wstrzyknięciu). MIP-1. zwiększona proporcjonalna liczba degranulowanych komórek tucznych. n = 6 na grupę; P <0,05. Wartości są wyrażone jako średnie. SEM. Eot, eotaxin-1. Rola MIP-1. w fizjologii komórek tucznych nie jest jasne i jest zaangażowane w aktywację, różnicowanie i naprowadzanie (21. 26). Faktyczna rola MIP-1. w biologii mastocytów in vivo jest słabo poznany. Aby bezpośrednio sprawdzić, czy MIP-1. może aktywować komórki tuczne spojówki in vivo, najpierw wstrzyknęliśmy rekombinowany MIP-1. pod spojówką naiwnych myszy. Następnie analizowaliśmy morfologię rezydentnych komórek tucznych godzinę i 4 godziny po wstrzyknięciu za pomocą barwienia Giemsa i H & E. Dane wyraźnie pokazały, że MIP-1. stymulował aktywację komórek tucznych (wydłużanie i degranulację) i był związany ze zwiększoną liczbą wykrywalnych komórek tucznych po 4 godzinach (Figura 2C). Zgodnie z wcześniejszymi badaniami, MIP-1. również indukował szybką rekrutację neutrofili i eozynofili już po godzinie po wstrzyknięciu. Wraz z wynikami przedstawionymi na ryc. dane dostarczyły dodatkowych dowodów na indukowany alergenem MIP-1. w spojówce może przyczyniać się do aktywacji komórek tucznych. Aby przetestować to bardziej rygorystycznie, następnie przeanalizowaliśmy indukowaną alergenem degranulację komórek tucznych i ostre zapalenie u myszy z niedoborem MIP-1. [hasła pokrewne: sennik karmienie piersią, uzależnienie od leków przeciwbólowych, prostowanie keratynowe cennik ] [hasła pokrewne: ciekawe aplikacje na telefon, przychodnia władysławowo, szczepionka na dur brzuszny ]