Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych czesc 4

Podczas gdy podstawowy szczep myszy opracował jasne parametry ostrego zapalenia podczas okresu uczulenia, myszy z niedoborem MIP nie wykazały klinicznych objawów natychmiastowej nadwrażliwości. Co godne uwagi, myszy z niedoborem MIP-1. Were były niemal pozbawione ostrego stanu zapalnego po ostatecznym prowokacji (Figura 3). Każdy objaw klinicznej choroby. obrzęk spojówek, obrzęk powieki, zaczerwienienie powiek, łzawienie / rozładowanie i mrużenie oczu. był silnie hamowany. Figura 3 Niespokój wywołanej alergenem natychmiastowej reakcji nadwrażliwości i degranulacji komórek tucznych u myszy z niedoborem MIP-1 .. (A) Natychmiastowa reakcja nadwrażliwości, pokazana tutaj jako% maksymalnej punktacji klinicznej (zdefiniowanej jako suma wyników każdego objawu klinicznego), została zniesiona u myszy z niedoborem MIP-1 (. /.). n = 13 na grupę; P <0,05. (B) Degranulacja komórek tucznych była znacząco upośledzona u myszy z niedoborem MIP-1 .. (C) Całkowita liczba komórek tucznych u tych myszy nie była pod wpływem MIP-1. niedobór. Wartości są wyrażone jako średnie. SEM. Ponieważ aktywacja mastocytów prowadzi do ostrej fazy reakcji, dane te natychmiast zasugerowały, że MIP-1. niedobór rzeczywiście wpływał na aktywację komórek tucznych in vivo. Oceniliśmy degranulację komórek tucznych w prowokowanej spojówce MIP-1 (3 + / + i MIP-1 (3) /. szczepy. Zgodnie z tłumieniem objawów klinicznych (Figura 3A), procent zdegranulowanych komórek tucznych (zdegranulowana liczba komórek tucznych / całkowita liczba komórek tucznych x 100) był znacząco zmniejszony u myszy z niedoborem MIP-1 (Fig. 3B). Całkowite liczby komórek tucznych spojówek nie różniły się znacząco (Figura 3C) pomiędzy myszami z niedoborem WT i MIP-1 (brak danych). Dane te bezpośrednio wykazały, że MIP-1. było w jakiś sposób wymagane do optymalnej aktywacji komórek tucznych in vivo. Ponieważ w odpowiedzi immunologicznej na śluzówce pośredniczy zarówno faza indukcyjna, jak i faza efektorowa, istnieje kilka potencjalnych szlaków biologicznych (np. Rozwój komórek tucznych lub synteza Ig), za pomocą których MIP-1. niedobór może spowodować obniżoną aktywację komórek tucznych. Nasze kolejne eksperymenty koncentrowały się na określeniu, które ramię tej odpowiedzi jest upośledzone przez MIP-1. niedobór. W fazie indukcyjnej złożona seria zdarzeń komórkowych i molekularnych powoduje powstawanie podwyższonych poziomów swoistych dla alergenów IgE. Wymaga to odpowiedniej obróbki i prezentacji antygenu, dojrzewania komórek B i przełączania klas kierowanego przez komórki Th2. Jedną z oczywistych możliwości było to, że myszy z niedoborem MIP-1 miały defekt w jednym z tych etapów, co skutkowałoby zmniejszeniem poziomów swoistych dla alergenu IgE. To z kolei przejawia się w degranulacji komórek tucznych po prowokacji, ponieważ ograniczałoby to poziom receptora komórek tucznych na antygen. Nasza bezpośrednia analiza wszystkich możliwych przeciwciał. IgE, IgG1 lub IgG2a (Figura 4B). ujawnił, że nie ma deficytu w przeciwciałach u myszy z niedoborem MIP-1 (3. Przeciwnie, produkcja IgE swoistej dla alergenu była znacznie zwiększona u tych myszy. Ponieważ można zaobserwować, że zaobserwowana wielkość wzrostu swoistych IgE zwiększy aktywację komórek tucznych, dane wskazują, że upośledzona aktywacja komórek tucznych nie była związana z poziomem Ig. MIP-1. niedobór może zmniejszać aktywację komórek tucznych i objawy kliniczne w sposób bezpośredni lub pośredni. Analiza ochrony RNA pod kątem RNaz izolowanych ze spojówek myszy z niedoborem MIP-1. Z alergenem wykazała, że indukcja RANTES i MIP-2 jest upośledzona, podczas gdy MIP-1 ., limfotaktyna i TCA-3 są indukowane (Figura 4A ). Upośledzona degranulacja komórek tucznych u myszy z niedoborem MIP-1. Może być wyjaśniona przez MIP-1. niedobór lub redukcja RANTES lub innych ligandów CCR1. Figura 4 Lokalne wytwarzanie chemokin i swoista dla alergenu synteza Ig u myszy z niedoborem MIP-1 i typu dzikiego. (A) Profile indukcji chemokinowej w homogenatach oka z niedoborem MIP-1 (3 przez test ochrony przed RNazą. MIP-1. niedobór nie wpływał na indukcję eotaksyny-1, MIP-2, MCP-1 lub białka indukowalnego IFN-y 10 (IP-10) 24 godziny po prowokacji alergenem. Każda ścieżka reprezentuje RNA wyizolowane z dwóch reprezentatywnych oczu w każdej grupie. Ltn, limfotaktyna. (B) Poziomy Ig w surowicy specyficzne dla alergenu u immunizowanych myszy. MIP-1. niedobór nie zaburzał syntezy IgG w surowicy (IgE, IgG1, IgG2a). n = 9 na grupę. Poziomy IgG swoistych dla alergenu (IgE, IgG1, IgG2a) u myszy immunizowanych pozornie były poniżej granic wykrywalności (dane nie pokazane). Wartości są wyrażone jako średnie. SEM. Od wczesnej fazy typu I (klasyfikacja Gel i Coombs) reakcje nadwrażliwości mogą być zależne od mastocytów lub niezależne (w zależności od schematów uczulania), potwierdziliśmy, że reakcja wczesnej fazy jest rzeczywiście zależna od komórek tucznych w tym modelu [więcej w: operacja ścięgna achillesa, szczepionka na dur brzuszny, licówki porcelanowe cennik ] [podobne: bóle kręgosłupa piersiowego, receptory adrenergiczne, lendacin ]