Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 8

Podobnie jak w modelu OVA, miejscowa blokada C5aR z neutralizującym mAb anty-C5aR lub C5aRA przed uczuleniem płucnym HDM spowodowała nadmierne wytwarzanie cytokin Th2, związanych z odpowiedzią komórkową limfocytów Th2, silnym zapaleniem dróg oddechowych i zwiększoną AHR. Tak więc, wykazaliśmy przez 3 niezależne podejścia w 2 niezależnych modelach zwierzęcych, że sygnalizacja C5aR podczas uczulenia płucnego alergenu chroni przed rozwojem energicznych adaptacyjnych odpowiedzi immunologicznych Th2. Co istotne, zniesienie sygnalizacji C5aR w nieobecności alergenu wywołało niewielką skośną odpowiedź immunologiczną dla Th2, co sugeruje, że niektóre sygnały przez konstytutywnie eksprymowany C5aR na próbce antygenu, DC płucne są niezbędne do zapobiegania indukcji limfocytów efektorowych obciążonych Th2. W pozornym przeciwieństwie do naszych ustaleń, Peng et al. donoszą, że myszy B10.D2 / oSnJ z niedoborem C5 nie cierpią na zwiększoną indukowaną alergenem AHR w porównaniu z myszami BALB / c wystarczającymi dla C5 (17). Continue reading „Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 8”

Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 7

Należy zauważyć, że blokada C5aR nie miała wpływu na wytwarzanie chemokin CCL17 i CCL22 (dane nie pokazane). Zatem C5a wywiera właściwości proalergiczne w ustalonym środowisku alergicznym. Ryc. 8Objawienie proalergicznych i przeciwalergicznych skutków C5a podczas fazy efektorowej w alergii płucnej. C5aR był blokowany dzień przed końcową ekspozycją na HDM przez podawanie neutralizującego mAb anty-C5aR. Continue reading „Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 7”

Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 6

Co ważne, liczby mDC od myszy eksponowanych na HDM były znacznie wyższe w obecności targetowania C5aR niż w nieobecności blokady C5aR (Figura 6B), co dawało stosunek mDC / pDC 17,5 w myszach traktowanych anty-C5aRp w porównaniu z stosunek 5 u nieleczonych myszy (Figura 6B). Ponadto, stosunek mDC / pDC wzrósł 2-krotnie, gdy C5aR był zablokowany przy braku ekspozycji na alergen (Figura 6B). Dane te sugerują bezpośredni wpływ C5a na DC płucne, który reguluje równowagę między mDC i pDC w środowisku płucnym w warunkach stanu ustalonego, jak również w odpowiedzi na ekspozycję na alergen. Figura 6 Wpływ docelowego C5aR na kompozycję podzbioru DC płucnego. Liczby mDC i pDC (A i B, lewe panele) zebrano z płuc myszy BALB / c eksponowanych na HDM 16 godzin po końcowej ekspozycji (A) lub pierwotnej (B) in vivo. Continue reading „Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 6”

Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę czesc 4

Kinetyka indukcji płucnego mRNA C5aRA u myszy C5aRA-Ccsp dTg. RT-PCR wykonano z próbek myszy C5aRA-Ccsp dTg w pełnym płucu, które otrzymywały wodę pitną bez doks (dzień 0) lub wodę uzupełnioną doks (0,5 mg / ml) przez dzień, 3 dni lub 7 dni. Reakcje kontrolne ze starterami GAPDH przedstawiono na dolnym panelu. (Panel dolny) Specyficzność narządową aktywacji Tg u myszy dTg C5aRA-Ccsp leczonych dox przez 7 dni. Ścieżka 1, płuco od myszy C5aRA sTg; ścieżki 2. Continue reading „Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę czesc 4”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń czesc 4

Ponadto, kilka obszarów odcinka tętniczego wystawionych na działanie FGFR1DN wykazało całkowitą utratę wyściółki śródbłonkowej, prowadząc do ekspozycji podstawowej błony podstawnej i adhezji płytek krwi. Aby dodatkowo ocenić wygląd połączeń śródbłonkowych, zastosowaliśmy transmisyjną mikroskopię elektronową. Podczas gdy połączenia śródbłonka eksponowane z wirusem kontrolnym były szczelnie zamknięte (Figura 4C), śródbłonek transdukowany przez FGFR1DN wykazał otwarte połączenia i odłączenie komórek śródbłonka (Figura 4, Dł F) Figura 4 Wpływ hamowania FGF w śródbłonku: analizy mikroskopii elektronowej. (A) Analiza SEM tętnic udowych szczurów transdukowanych Ad-Null. Ściana tętnic pokazuje występy powstałe w wyniku skurczów w leżących poniżej komórkach mięśni gładkich (górny panel, podziałka: 50 .m). Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń czesc 4”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń cd

W zgodzie z obserwowaną utratą integralności układu naczyniowego tchawicy, zaobserwowano znaczny wzrost retencji błękitów Evansa w mięśniu szkieletowym u myszy eksponowanych na sFGFR1IIIc, ale nie na wirusa sFGFR3IIIb i kontrolnych (Figura 2B). W tym samym niebieskim oznaczeniu Evans wykazano znaczny wzrost przepuszczalności zarówno w tkance mięśnia sercowego, jak i w tkance płucnej u myszy eksponowanych na sFGFR1IIIc i sFGFR3IIIc, ale nie u zwierząt kontrolnych lub sFGFR3IIIb (Figura 2C). Figura 2 Znieczulona integralność naczyń u myszy pozbawionych sygnalizacji FGF. (A) Zwiększona przepuszczalność naczyń i zaburzona morfologia śródbłonka u myszy sFGFR1IIIc. Dziesięć dni po wstrzyknięciu adenowirusa myszom C57BL / 6, naczynia krwionośne tchawicy wybarwiono na CD31 (czerwony). Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń cd”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad

Zatem FGF odgrywają główną rolę w utrzymaniu integralności naczyniowej w istniejącym dojrzałym układzie naczyniowym. Wyniki Hamowanie sygnalizacji FGF za pomocą pułapek sFGFR. Aby zahamować sygnalizację FGF w układzie naczyniowym dorosłych myszy, zastosowano systemową ekspresję sFGFR (17), w której pośredniczy adenowirus, podobnie jak wcześniej stosowana strategia anty-VEGF (18). Wybrano trzy izoformy splicingowe FGFR: FGFR1IIIc, FGFR3IIIb i FGFR3IIIc. FGFR1IIIc wiąże FGF1, -2, -4, -5, -6 i -8, podczas gdy FGFR3IIIb wiąże głównie FGF1 i FGF9 z niższym powinowactwem i -20. Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń

Integralność monowarstwy śródbłonka ma zasadnicze znaczenie dla homeostazy naczyń krwionośnych i aktywnej regulacji przepuszczalności śródbłonka. System FGF odgrywa ważną rolę w wielu różnych stanach fizjologicznych i patologicznych; jednak jego rola w dojrzałym unaczynieniu nie została zdefiniowana. Aby ocenić rolę układu FGF w monowarstwie dorosłego śródbłonka, zakłóciliśmy sygnalizację FGF w komórkach śródbłonka aorty bydlęcej i komórkach śródbłonka żyły odpiszczelowej człowieka in vitro oraz w dorosłych komórkach śródbłonka myszy i szczura in vivo przy użyciu rozpuszczalnych pułapek FGF lub dominującego inhibitora FGF. wszystkie receptory FGF. Zahamowanie sygnalizacji FGF przy użyciu tych podejść spowodowało dysocjację kompleksu VE-kadheryna / p120-katenina i demontaż adherenów i ciasnych połączeń, które uległy progresji do utraty komórek śródbłonka, ciężkiemu upośledzeniu funkcji bariery śródbłonkowej i ostatecznie dezintegracji układ naczyniowy. Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń”

Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 10

Ponadto nie zaobserwowaliśmy żadnego skurczu ASM ani zapalenia dróg oddechowych po wkropleniu C5a / C5adesArg do myszy, które nie były naiwne w stężeniach, które spowodowały niewydolność oddechową, silny skurcz dróg oddechowych, zapalenie i 50% śmiertelność u świnek morskich (38). Dane te sugerują, że C5aR nie ma bezpośredniego wpływu na skurcz ASM i / lub że ligacja C5aR na komórkach pierwotnych nie jest wystarczająca do uwolnienia mediatorów oskrzelowych, które indukują skurcze ASM u świnek morskich (58). Przeciwnie, C5a i C5adesArg indukują skurcz ASM i nasilają zapalenie dróg oddechowych w stanach zapalnych, co sugeruje, że ligacja C5aR na infiltrujących komórkach (np. Neutrofilach, eozynofilach) i / lub regulacja w górę i ligacja C5aR na komórkach rezydujących w płucach (komórki nabłonka, ASM ) jest warunkiem wstępnym odpowiedzi skurczowej. Wyższa moc C5adesArg do wywoływania skurczu oskrzeli może być wyjaśniona przez jego funkcję jako superaginisty do uwalniania IL-13 z bazofilów (59). Continue reading „Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 10”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 9

W przypadku braku sygnalizacji FGF, kadheryna VE podlega odsprzęganiu p120-kateniny prowadząc do utraty adherenów i ciasnych połączeń, zwiększonej nieszczelności naczyniowej i demontażu istniejącego układu naczyniowego. Wyniki te pokazują istotną rolę sygnalizacji FGF w utrzymaniu integralności naczyń. Metody Budowa genów. Mysi klon cDNA FGFR1 (flg) a 341-733 był prezentem A. Mansukhani (New York University, New York, New York, USA). Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 9”