Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 6

Co ważne, liczby mDC od myszy eksponowanych na HDM były znacznie wyższe w obecności targetowania C5aR niż w nieobecności blokady C5aR (Figura 6B), co dawało stosunek mDC / pDC 17,5 w myszach traktowanych anty-C5aRp w porównaniu z stosunek 5 u nieleczonych myszy (Figura 6B). Ponadto, stosunek mDC / pDC wzrósł 2-krotnie, gdy C5aR był zablokowany przy braku ekspozycji na alergen (Figura 6B). Dane te sugerują bezpośredni wpływ C5a na DC płucne, który reguluje równowagę między mDC i pDC w środowisku płucnym w warunkach stanu ustalonego, jak również w odpowiedzi na ekspozycję na alergen. Figura 6 Wpływ docelowego C5aR na kompozycję podzbioru DC płucnego. Liczby mDC i pDC (A i B, lewe panele) zebrano z płuc myszy BALB / c eksponowanych na HDM 16 godzin po końcowej ekspozycji (A) lub pierwotnej (B) in vivo. Pokazano również wyliczone współczynniki mDC / pDC (prawe panele). n = 8. 10 na grupę. ** P <0,001; * P <0,05. C5a hamuje gromadzenie się efektorowych komórek Th2 poprzez negatywną regulację ekspresji CCL17 i CCL22. Oprócz zdolności do aktywacji limfocytów CD4 +, DC płucne odgrywają ważną rolę w rekrutacji komórek efektorowych Th2. Stwierdzono, że mDC pochodzące z ludzkiej krwi, ale nie pDC, wydzielają ligand chemokiny CC17 (CCL17), znany również jako grasica i chemokina regulowana aktywacją (TARC), oraz CCL22, znany również jako chemokina pochodząca z makrofagów (MDC), oba z które są ligandami dla CC receptora 4 chemokiny (CCR4), preferencyjnie eksprymowane na spolaryzowanych komórkach efektorowych Th2 (36). Postawiliśmy hipotezę, że wysokie stężenia cytokin Th2 w supernatantach współhodowanych limfocytów CD11 + DC4 + + u myszy traktowanych anty-C5aRa (Figura 5B) mogą wynikać z dużej liczby efektorowych komórek Th2 rekrutowanych poprzez zwiększone uwalnianie CCL17 i / lub CCL22 z DC płucne. Rzeczywiście, liczba aktywowanych limfocytów CD4 + CD69 + była istotnie wyższa u myszy eksponowanych na HDM w obecności niż przy braku leczenia mAb anty-C5aR (Figura 7A). Ten wzrost efektorowych komórek Th2 był związany z wysokimi stężeniami CCL17 i CCL22 w współhodowlach limfocytów CD11c + DC / CD4 + z myszy, u których przekazywano sygnałowanie C5aR (Figura 7B). Stężenia CCL17 i CL22 w hodowlach z grupy PBS i myszy eksponowanych na HDM były 3- do 4-krotnie niższe, co sugeruje, że C5a negatywnie reguluje ekspresję chemokiny CCL17 i CCL22 z płucnych DC. W zgodzie z tymi danymi, stwierdziliśmy zwiększoną produkcję wytwarzania CCL17 i CCL22 u myszy z niedoborem C5aR, które eksponowano na OVA w porównaniu z myszami dostatecznymi do C5aR (dodatkowa figura 2D). Alternatywnie jednak zwiększone stężenie chemokin CCL u myszy, do których skierowana jest C5aR, może wynikać ze zwiększonego stanu zapalnego i ze znanych pozytywnych efektów regulacyjnych cytokin Th2, IL-4 i IL-13. Aby zminimalizować takie efekty zapalne, określiliśmy wytwarzanie CCL17 i CCL22 z hodowli limfocytów CD11c + DC / CD4 + nieostrych myszy 16 godzin po pierwotnej ekspozycji na HDM. Ponownie, stężenia CCL17 i CCL22 były znacznie wyższe w obecności niż w nieobecności leczenia anty-C5aR (Figura 7C). Co ważne, nie znaleźliśmy wytwarzania IL-4 ani IL-13 w takich współ-hodowlach (dane nie pokazane). Figura 7C5a tłumi rekrutację komórek efektorowych Th2 poprzez negatywną regulację CCL17 i CCL22. (A) Zwiększona liczba aktywowanych komórek efektorowych Th2 w odpowiedzi na blokadę C5aR. Limfocyty izolowano z tkanki płucnej 16 godzin po końcowej ekspozycji na HDM w obecności lub pod nieobecność blokady C5aR. Komórki wybarwiono w celu ekspresji markerów powierzchni CD4 i CD69. (B) Wytwarzanie CCL17 i CCL22 z współhodowli sortowanych FACS CD11c + DC i komórek T CD4 +. (C) Taki sam jak B, z tym wyjątkiem, że wytwarzanie chemokin pochodzi z współhodowli CD11c + DC i komórek T CD4 +, które sortowano FACS 16 godzin po pierwszej ekspozycji HDM. n = 8. 10 na grupę. ** P <0,001; * P <0,05. Sygnalizacja C5aR promuje zapalenie dróg oddechowych i zwężenie oskrzeli podczas fazy efektorowej odpowiedzi alergicznej. Nasze odkrycia, że sygnalizacja C5aR zapobiega nadmiernemu zapaleniu dróg oddechowych i odporności adaptacyjnej typu 2, kontrastuje z danymi sugerującymi, że C5a przyczynia się do fenotypu alergicznego (15. 17). Aby ocenić rolę sygnalizacji C5aR podczas fazy efektorowej, celowaliśmy w sygnalizację C5aR wyłącznie przed ostatecznym testem HDM (Figura 8). W zgodzie z poprzednimi wynikami (15. 17), zapalenie alergiczne zostało zmniejszone, o czym świadczy zmniejszona liczba eozynofilów i limfocytów w BAL (Figura 8A). Ponadto, reaktywność dróg oddechowych została znacznie zmniejszona (Figura 8C). W przeciwieństwie do blokady C5aR podczas uczulenia (ryc. 2 i 3), nie stwierdziliśmy wpływu sygnalizacji C5aR na wytwarzanie IL-4 i IL-10 z komórek płucnych (Figura 8B); jednak produkcja IL-5 i IL-13 została wzmocniona, choć w mniejszym stopniu, w porównaniu z efektem blokady C5aR przed początkową ekspozycją na alergen (Figura 8B w porównaniu z Figurą 3A) [podobne: sennik karmienie piersią, problemy z tarczycą objawy, chirurgia plastyczna szczecin ] [hasła pokrewne: zaburzenia psychiczne u dzieci, kawa rozpuszczalna skład, ciekawe aplikacje na telefon ]