Rola regulacyjna anafilatoksyny C5a w odporności typu 2 na astmę ad 7

Należy zauważyć, że blokada C5aR nie miała wpływu na wytwarzanie chemokin CCL17 i CCL22 (dane nie pokazane). Zatem C5a wywiera właściwości proalergiczne w ustalonym środowisku alergicznym. Ryc. 8Objawienie proalergicznych i przeciwalergicznych skutków C5a podczas fazy efektorowej w alergii płucnej. C5aR był blokowany dzień przed końcową ekspozycją na HDM przez podawanie neutralizującego mAb anty-C5aR. Wszystkie eksperymenty przeprowadzono 72 godziny po końcowej ekspozycji HDM in vivo. (A) Całkowita i różna liczba komórek w BAL. (B) Profile cytokin komórek płucnych. (C) Reakcja dróg oddechowych na iv Ach. n = 8. 10 na grupę. ** P <0,001; * P <0,05. Sygnalizacja C5aR promuje zapalenie dróg oddechowych i skurcz dróg oddechowych poprzez infiltrację komórek zapalnych, ale nie ma bezpośredniego wpływu na skurcz mięśni gładkich dróg oddechowych. Aby określić mechanizm, który może tłumaczyć stłumiony fenotyp alergiczny w odpowiedzi na sygnalizację C5aR podczas fazy efektorowej, określiliśmy wpływ C5a i jego produktu degradacji, C5adesArg, w którym C-końcowy Arg74 został odcięty, na mięśniach gładkich dróg oddechowych. (ASM) skracanie ex vivo i in vivo. C5a i C5adesArg zostały opisane jako indukujące skurcze ASM u naiwnych świnek morskich, zarówno ex vivo, przy użyciu tchawiczych pasków (37), jak i in vivo (38). Nie ma jednak danych dotyczących wpływu C5a / C5adesArg na skurcze mysiego ASM. W przeciwieństwie do danych uzyskanych dla świnek morskich, podanie C5a / C5adesArg nie wywoływało skurczu izolowanych pasków tchawicy (Figura 9A) ani skurczu ASM in vivo po wkropleniu do nieleczonych myszy BALB / c (Figura 9B), chociaż komórki ASM wyrażają C5aR (39 ). Przeciwnie, zaobserwowaliśmy silny skurcz ASM po podaniu C5a / C5adesArg myszom, które wielokrotnie były eksponowane na HDM (Figura 9B). Ponadto, zapalenie dróg oddechowych zwiększało się po miejscowym C5adesArg, ale nie po prowokacji C5a, o czym świadczą zwiększone liczby eozynofili (Figura 9C). Ponadto podawanie zarówno C5a, jak i C5adesArg zwiększyło liczbę limfocytów, co sugeruje, że C5a / C5adesArg służą jako chemoatraktanty dla aktywowanych limfocytów. Rycina 9 Wpływ C5a i C5adesArg na skurcz ASM i zapalenie dróg oddechowych. (A) Skurcz ASA w pierścieniach tchawicy stymulowany przez Ach, C5a lub C5adesArg. Pokazano maksymalną bezwzględną siłę izometryczną wywołaną przez wskazane czynniki. (B) Zwężenie oskrzeli w odpowiedzi na podanie C5a / C5adesArg myszom naiwnym (lewy panel) i myszom wielokrotnie narażonym na HDM (prawy panel), odpowiednio. (C) Całkowita i różnicowa liczba komórek w odpowiedzi na to wkraplanie C5a / C5adesArg myszom wielokrotnie (x 4) wystawionym na działanie HDM. n = 6. 10 na grupę. * P <0,05. Dyskusja Próbując pogodzić sprzeczne dane na temat roli C5 / C5a w eksperymentalnej astmie alergicznej (15-18), postawiliśmy hipotezę, że zniesienie sygnalizacji C5aR podczas uczulenia alergenem lub podczas fazy efektorowej w alergii płuc ma przeciwne skutki. Dokładniej mówiąc, zaproponowaliśmy, że sygnalizacja C5aR podczas uczulenia alergenem chroni przed rozwojem alergii płucnej, ale wzmacnia fenotyp alergiczny w zapalnym środowisku płucnym podczas fazy efektorowej. Aby przetestować tę hipotezę, najpierw celowaliśmy w C5aR przed początkowym spotkaniem antygenu. Skupiliśmy się na modelach, w których alergen jest podawany wyłącznie drogą płucną w celu modelowania zdarzeń prowadzących do odpowiedzi immunologicznej Th2 w astmie alergicznej. Zgodnie z przewidywaniami ekspozycja na OVA płucna przy braku sygnalizacji C5aR nie powodowała tolerancji inhalacyjnej (25, 40), ale indukowała silną aktywację komórek T CD4 + i komórek B, o czym świadczy zaznaczona cytokina Th2 i wytwarzanie IgE, związane z oznakowane zapalenie dróg oddechowych, wytwarzanie śluzu i wzrost AHR wywoływanej przez alergen. Warto zauważyć, że bezwzględny wzrost wytwarzania cytokiny Th2, w szczególności IL-13 (41), był niższy w C5aRc / p. myszy niż u myszy celowanych C5aR, co prawdopodobnie będzie odpowiadać za brak zwiększonej AHR wywoływanej przez alergen w C5aRc /. myszy. Chociaż sugestywne, nasze dane nie dostarczają żadnych bezpośrednich dowodów na to, że tolerancja jest zerwana w przypadku braku sygnalizacji C5aR. Aby zbadać wpływ sygnalizacji C5aR na uczulenie alergenem w otoczeniu, które ma znaczenie dla ludzkiej astmy i atopii, skoncentrowaliśmy się na Dermatophagoides pteronyssinus gatunku HDM, który odpowiada za objawy atopowe u 10% osób z astmą (42). Co ważne, proteazy z gatunków Dermatophagoides mogą rozszczepiać C3 i C5 w swoich aktywnych fragmentach in vitro (3). Zgodnie z oczekiwaniami, stwierdziliśmy wysokie stężenia C3a w BAL po wielokrotnym narażeniu na HDM [przypisy: hydrominum skutki uboczne, brzoskwinie wartości odżywcze, licówki porcelanowe cennik ] [patrz też: barwa siarkowa moc, womp zielona góra, bóle kręgosłupa piersiowego ]