Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych ad 7

Wartości są wyrażone jako średnie. SEM. Aby odbierać sygnały kosztowe z MIP-1. bezpośrednio, komórki tuczne spojówki będą musiały wyrażać receptory CCR1 lub CCR5. Podczas poprzednich eksperymentów in vitro wykazujących bezpośrednią aktywację komórek tucznych za pomocą MIP-1. Continue reading „Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych ad 7”

Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy ad 8

Ekspresję białkową kinaz Src oznaczono ilościowo za pomocą analizy densytometrycznej z użyciem przyrządów ImagerMaster VDS (Amersham Pharmacia Biotech). IP i aktywność kinazy in vitro różnych kinaz Src. W celu przeanalizowania całkowitej aktywności komórkowej różnych kinaz Src, komórki (2 x 106 dla każdego oznaczenia) ponownie zawieszono i poddano lizie przez godzinę w 4 ° C w 450 ul buforu B zawierającego 20 mM Tris / HCl, pH 7,5, 10% glicerol, 1% Triton X-100, mM EDTA, 50 mM NaCl, mM ortowanadan sodu i koktajl inhibitora proteazy. Po odwirowaniu supernatanty inkubowano przez 2 godziny w temperaturze 4 ° C z odpowiednim przeciwciałem kinazy Src związanym z białkiem Aa-sefarozą. Immunokompleksy przemyto 3 razy przez odwirowanie i ponownie przeprowadzono w stan zawiesiny w buforze C (50 mM Tris / HCl, pH 7,5, zawierający koktajle fosfataz i inhibitorów proteazy). Continue reading „Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy ad 8”

Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy

Przewlekła białaczka limfocytowa z komórek B (B-CLL) jest chorobą nowotworową charakteryzującą się akumulacją limfocytów B z powodu niekontrolowanego wzrostu i odporności na apoptozę. Analiza komórek B świeżo izolowanych od 40 pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową wykazała, że kinaza Src Lyn, cząsteczka przełączająca, która łączy receptor komórki B z sygnalizacją w dół, wykazuje anomalne właściwości. Lyn wykazuje niezwykłą nadekspresję na poziomie białka w komórkach białaczkowych w porównaniu z normalnymi limfocytami B, z istotną podwielokrotnością kinazy anomalnie obecną w cytozolu. Podczas gdy w prawidłowych limfocytach B aktywacja Lyn jest zależna od stymulacji receptora limfocytów B, w spoczynkowych komórkach złośliwych, konstytutywna aktywność kinazy odpowiada za fosforylację tyrozyny o wysokim poziomie podstawowym i niską reakcję na ligację IgM. Dodanie inhibitorów Lyn PP2 i SU6656 do białkowych hodowli komórkowych przywraca apoptozę komórek, a leczenie złośliwych komórek lekami indukującymi apoptozę komórek zmniejsza zarówno aktywność, jak i ilość kinazy tyrozynowej. Continue reading „Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy”

Hsp104 antagonizuje agregację a-synukleiny i zmniejsza degenerację dopaminergiczną w szczurzym modelu choroby Parkinsona czesc 4

Ocenę ilościową gęstości włókien TH-IR przeprowadzono w prążkowiu. Zgodnie z neuroprotekcyjnym działaniem Hsp104 na poziomie komórkowym, ekspresja Hsp104 znacząco zmniejszyła utratę terminacji nerwów z 21,6% (A30P / YFP) do 7% (A30P / Hsp104) (P <0,05; n = 7) (Figura 2B) . Następnie użyliśmy barwienia srebrem jako markera dla degenerujących się neuronów u zwierząt wykazujących ekspresję A30P / YFP lub A30P / Hsp104 (42, 47, 48). Nie zaobserwowano barwienia srebrem w niestrzyżonej istocie czarnej (fig. 3, A i D). Continue reading „Hsp104 antagonizuje agregację a-synukleiny i zmniejsza degenerację dopaminergiczną w szczurzym modelu choroby Parkinsona czesc 4”

Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby ad 6

Doprowadziło to do identyfikacji 3 kompozytowych modeli pochodzących z qPCR zawierających 2. 7 genów wykazujących niezwykłą dokładność przy rozróżnianiu TOL z próbek innych niż TOL zarówno w treningowych, jak i niezależnych zestawach do walidacji. Eksperymenty qPCR obejmowały dodatkową grupę próbek pobranych od zdrowych, nieprzyjmowanych osobników (CONT). Pozwoliło to na porównanie wzorców ekspresji TOL i CONT. Podczas gdy sygnatury ekspresji związane z tolerancją przypominały bardziej CONT niż wzory inne niż TOL, połowa genów wyrażona w różny sposób między próbami TOL i nie-TOL była również znacząco różna przy porównywaniu próbek TOL i CONT. Continue reading „Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby ad 6”

Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera ad 10

To stwierdzenie jest zgodne z naszą roboczą hipotezą, że umieszcza aktywację kalpainy w dół od A. wiąże się z komórkowymi celami i ostatecznie wpływa na fosforylację CREB (49). Chociaż nie wpływa to na całkowite A. poziomy, hamowanie kalpain może wywierać wartościowe działanie terapeutyczne w AD przez zablokowanie kaskad inicjowanych przez kalpain indukowanych przez oba A. i inne czynniki ryzyka AD, które zbiegają się na kalpach. Continue reading „Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera ad 10”

Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera ad

Dysocjowane kultury komórek hipokampa są szczególnie użytecznym modelem do badania podstawowej neurotransmisji i plastyczności synaptycznej. Hodowle komórkowe zwierząt transgenicznych wykazują wiele cech obserwowanych w AD, w tym wytwarzanie podwyższonych poziomów A. i dysfunkcja synaptyczna (32, 33). Tak więc, jako pierwsze narzędzie do naszych badań, wykorzystaliśmy preparaty do hodowli komórek hipokampa pochodzące od myszy APP / PS1 (34). Najpierw potwierdziliśmy wyniki dotyczące lokalizacji synaptycznej kalpain w kulturach neuronowych hipokampu (3). Continue reading „Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera ad”

ABCG1 i HDL chronią przed dysfunkcją śródbłonka u myszy karmionych dietą bogatą w cholesterol

Poziom HDL w osoczu jest odwrotnie proporcjonalny do częstości występowania choroby miażdżycowej. Niektóre z efektów ochronnych przed rozwojem oskrzeli HDL są prawdopodobnie pośredniczone poprzez zachowanie funkcji EC. Nie badano, czy korzystny wpływ HDL na EC zależy od jego wpływu na wypływ cholesterolu przez transportery kasety wiążącej ATP ABCA1 i ABCG1, które promują wypływ cholesterolu i oksysteroli z makrofagów. Aby rozwiązać ten problem, ocenialiśmy funkcję śródbłonka w Abca1 (3, Abcg1 (3 / I, i Abca1 (3 / Abcg1 (3). myszy karmione dietą wysokocholesterolową (HCD) lub dietą zachodnią (WTD). Continue reading „ABCG1 i HDL chronią przed dysfunkcją śródbłonka u myszy karmionych dietą bogatą w cholesterol”

Przeszczepienie komórek macierzystych nerki może poprawić fenotyp mysiego modelu rdzeniowego zaniku mięśni czesc 4

Neurony GFP + wykryto w przednim rogu rdzenia kręgowego, jak pokazano w przekrojach wieńcowych rdzenia kręgowego (A, rdzeń kręgowy szyjny, B, rdzeń kręgowy lędźwiowy). Immunohistochemia markerów neuroektodermalnych potwierdza, że komórki te są zróżnicowane na neurony. Mikroskopia konfokalna wykazała, że neurony pochodzące od dawcy GFP + współeksprymują białka swoiste dla neuronu, takie jak NeuN (C) i MAP2 (D). Komórki GFP + wykazują właściwości motoryczno-neuronowe, co wykazano przez dwukrotne barwienie immunofluorescencyjne GFP (zielone) pod wpływem promotora motoneuronalnego specyficznego dla HB9 i neuroprzekaźnika cholinergicznego (E, GFP; F, ChAT; G, łączenie). (H. Continue reading „Przeszczepienie komórek macierzystych nerki może poprawić fenotyp mysiego modelu rdzeniowego zaniku mięśni czesc 4”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 8

Dla zachowania normalnej morfologii nabłonka istotna jest interakcja E-kadheryna / p120-katenina, a adhezja za pośrednictwem kadheryny jest upośledzona jako bezpośrednia konsekwencja niewydolności p120 (36). Ponadto p120-katenina kontroluje obrót kadheryny, regulując w ten sposób poziomy kadheryny. Zwalnianie p120-kateniny przez siRNA powoduje zależną od dawki eliminację wielu kadheryn, w tym VE-kadheryny w komórkach śródbłonka i całkowitą utratę adhezji komórkowej (37). Regulacja stabilności i internalizacji kadheryny VE ma kluczowe znaczenie dla kontroli przepuszczalności śródbłonka i funkcji bariery. p120-katenina hamuje endocytozę VE-kadheryn poprzez mechanizm, który wymaga bezpośrednich interakcji między p120-kateniną a domięśniową domeną VE-kadheryną (38). Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 8”