Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych

Regulacja odpowiedzi immunologicznej wymaga współpracy wielu sygnałów w aktywacji komórek efektorowych. Na przykład, limfocyty T wymagają sygnałów pochodzących zarówno z TCR dla antygenu (po rozpoznaniu MHC / peptydu antygenowego) i receptorów dla cząsteczek kostymulujących (np. CD80 i CD60) dla pełnej aktywacji. Tutaj pokazujemy, że reakcje IgE-zależne w spojówce również wymagają wielu sygnałów. Natychmiastowe reakcje nadwrażliwości w spojówce były hamowane u myszy z niedoborem białka zapalnego makrofagów. Continue reading „Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych”

Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy cd

Ponieważ Lyn jest członkiem rodziny Src, która jest głównie eksprymowana w limfocytach B i jest jedną z pierwszych cząsteczek uczestniczących w transdukcji sygnałów z BCR, ocenialiśmy ilość białka Lyn obecnego w białaczce Komórki B odzyskane od pacjentów z CLL w odniesieniu do normalnych limfocytów B. W porównaniu z limfocytami B kontrolnymi, wszystkie 40 analizowanych próbek B-CLL eksprymowało większe ilości izoform zarówno p53, jak i p56 (Figura 3A). Analiza densytometryczna zawartości białka Lyn wykazała nadekspresję B-CLL w zakresie od 2,5 do 5 razy większą niż ilość obserwowana w prawidłowych komórkach B. W przeciwieństwie do tego, analiza Western blot Src, Fyn, c-Fgr i Lck wykazała, że ilości białek komórkowych tych kinaz Src były podobne w komórkach prawidłowych i białaczkowych (Figura 3A). Figura 3 Ekspresja białek kinazy Src i mRNA Lyn w prawidłowych i CLL komórkach B. Continue reading „Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy cd”

Hsp104 antagonizuje agregację a-synukleiny i zmniejsza degenerację dopaminergiczną w szczurzym modelu choroby Parkinsona ad 6

Mutant nie hamował fibrylizacji. Zatem maksymalne zahamowanie fibrylizacji P-synów wymaga wiązania ATP i hydrolizy przez Hsp104. Następnie testowaliśmy, czy Hsp104 może hamować fibrylizację połączonych przez PD wariantów a-synów, w tym A30P, A53T i E46K. A53T i E46K łączą się z włóknami amyloidowymi szybciej niż typu dzikiego typu. -Syn, podczas gdy A30P uzyskuje dostęp do preamonoidalnych oligomerów szybciej niż typ dziki, ale zajmuje dłużej tworzenie włókien (7, 19). Continue reading „Hsp104 antagonizuje agregację a-synukleiny i zmniejsza degenerację dopaminergiczną w szczurzym modelu choroby Parkinsona ad 6”

Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby ad 8

Dodatkowo, próbki krwi obwodowej uzyskano również z 16 dopasowanych pod względem wieku zdrowych kontrolnych (CONT) i 19 biorców STA, którzy spełniali wyżej wymienione kryteria kliniczne dla odstawienia leku. U pacjentów spełniających te kryteria częstość występowania tolerancji operacyjnej wynosi od 20% do 30% (5, 8). Charakterystyka kliniczna i demograficzna pacjentów uwzględnionych w badaniu podsumowano w Tabeli 1. Badanie zostało zaakceptowane przez Institutional Review Boards wszystkich uczestniczących instytucji i uzyskano świadomą zgodę od wszystkich pacjentów. Ostatnio opublikowano raport zawierający wyniki badań immunofenotypowania komórek krwi wraz z wstępnymi danymi ekspresji genów mikromacierzy uzyskanymi od podgrupy pacjentów włączonych do niniejszego badania (11). Continue reading „Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby ad 8”

Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby

Część biorców przeszczepu wątroby jest w stanie przerwać wszystkie terapie immunosupresyjne bez odrzucania ich przeszczepów i uważa się, że są operacyjnie tolerancyjni dla przeszczepu. Jednak dokładna identyfikacja tych odbiorców pozostaje wyzwaniem. Aby zaprojektować klinicznie odpowiedni test molekularny tolerancji operacyjnej w transplantacji wątroby, przebadaliśmy wzory transkrypcji we krwi obwodowej 80 biorców przeszczepionej wątroby i 16 nieprzeszczepionych osób zdrowych, stosując mikromacierze oligonukleotydowe i ilościową PCR w czasie rzeczywistym. Doprowadziło to do odkrycia i zatwierdzenia kilku sygnatur genów zawierających niewielką liczbę genów zdolnych do identyfikacji tolerancyjnych i nietolerujących odbiorców z wysoką dokładnością. Wiele podzbiorów limfocytów krwi obwodowej przyczyniło się do wzorców transkrypcyjnych związanych z tolerancją, chociaż dominowały na nich komórki NK TCR i NK. Continue reading „Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby”

Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera czesc 4

Wyniki te potwierdzają wyniki za pomocą E64, co wskazuje, że inhibitory kalpainy można stosować do przywrócenia normalnej podstawowej częstotliwości spontanicznego uwalniania neuroprzekaźnika u myszy APP / PS1. Ponadto, ponieważ stężenie BDA-410 stosowane w tych doświadczeniach było bardzo niskie (poniżej progu inaktywacji innych proteaz), doszliśmy do wniosku, że działanie BDA-410 jest specyficzne dla jego działania hamującego wobec kalpain. Aby dodatkowo potwierdzić, że BDA-410 może ratować zmiany transmisji synaptycznej u myszy APP / PS1, zbadaliśmy wpływ związku na indukowane glutaminianem, długotrwałe wzmocnienie transmisji synaptycznej w hodowanych neuronach hipokampa. Powieliliśmy nasze poprzednie wyniki, pokazując, że krótkie zastosowanie glutaminianu (200. M) nie spowodowało zwiększenia częstotliwości mEPSC w hodowlach myszy APP / PS1 w porównaniu z hodowlami myszy WT (Figura 2C). Continue reading „Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera czesc 4”

ABCG1 i HDL chronią przed dysfunkcją śródbłonka u myszy karmionych dietą bogatą w cholesterol ad 5

Zbadaliśmy wpływ supresji ABCG1, ABCA1 i SR-BI przez transfekcję siRNA na cholesterol z udziałem HDL i masowy wypływ 7-KC. Western blot wykazał skuteczną supresję ABCG1 i SR-BI; jednak ABCA1 nie był łatwo wykrywany w komórkach traktowanych agonistą X, nieotrębnionych z receptorem X (Figura 6B, wkładka). Tłumienie ABCG1 znacząco zmniejszyło zarówno wypływ masy cholesterolu, jak i 7-KC (Figura 6B). Ani zahamowanie ABCA1, ani SR-BI nie wpłynęło na cholesterol ani na masowy wypływ 7-KC (Figura 6B). Dane te wskazują, że szlak wypływu sterolu, w którym pośredniczy ABCG1, jest dominujący w HAEC. Continue reading „ABCG1 i HDL chronią przed dysfunkcją śródbłonka u myszy karmionych dietą bogatą w cholesterol ad 5”

Przeszczepienie komórek macierzystych nerki może poprawić fenotyp mysiego modelu rdzeniowego zaniku mięśni ad 6

Endogenne neurony ruchowe LCM zidentyfikowano przez ekspresję ChAT i negatywności dla GFP, przy czym ta ostatnia była wyrażana tylko w komórkach dawcy. Różnice w poziomie ekspresji genu przedstawiono jako stosunki średnich wartości pomiędzy nieleczonymi myszami SMA i WT; traktowane myszy SMA i WT; i traktowane SMA i nieleczone myszy SMA. Ustalając znaczący poziom odcięcia do 2,3-krotnej zmiany i wyłączając geny o niskim poziomie ekspresji, wykryliśmy 42 geny, które wykazywały zróżnicowane poziomy ekspresji w neuronach ruchowych nieleczonych myszy SMA w porównaniu z myszami WT (Tabela uzupełniająca 1) i 31 takich genów w neuronach ruchowych leczonych w porównaniu z nieleczonymi myszami SMA (dodatkowa tabela 2). Przy poziomie odcięcia wynoszącym 1,9-krotną zmianę, 165 (neurony ruchowe myszy nieleczonych SMA w porównaniu z myszami WT) i 137 (neuronów ruchowych myszy leczonych w porównaniu do myszy nieleczonych SMA) wykazywały zmienne poziomy ekspresji. Hierarchiczne analizy skupień wyraźnie rozróżniły profile ekspresji 3 warunków eksperymentalnych (dodatkowe rysunki 7 i 8). Continue reading „Przeszczepienie komórek macierzystych nerki może poprawić fenotyp mysiego modelu rdzeniowego zaniku mięśni ad 6”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 10

Myszy następnie uśmiercono, krew odsączono przez perfuzję solą fizjologiczną, a mięśnie brzuchatego łydki, płuca i serce wycięto i wysuszono w 55 ° C. Niebieski barwnik Evansa w tkankach ekstrahowano formamidem przez 24 godziny w temperaturze 55 ° C, a jego fluorescencję przy 607 nm mierzono za pomocą czytnika fluorescencyjnego (BioTek). Doświadczenia Transwell-tracera z fluorescencyjnym dekstranem przeprowadzono stosując 24-dołkowy system Transwell HTS Fluoroblok (1,0. M porów, BD). BAEC (2 x 104) wysiano na błonę wkładki Transwell powleczoną 10 .g / ml fibronektyny. Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 10”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad

Zatem FGF odgrywają główną rolę w utrzymaniu integralności naczyniowej w istniejącym dojrzałym układzie naczyniowym. Wyniki Hamowanie sygnalizacji FGF za pomocą pułapek sFGFR. Aby zahamować sygnalizację FGF w układzie naczyniowym dorosłych myszy, zastosowano systemową ekspresję sFGFR (17), w której pośredniczy adenowirus, podobnie jak wcześniej stosowana strategia anty-VEGF (18). Wybrano trzy izoformy splicingowe FGFR: FGFR1IIIc, FGFR3IIIb i FGFR3IIIc. FGFR1IIIc wiąże FGF1, -2, -4, -5, -6 i -8, podczas gdy FGFR3IIIb wiąże głównie FGF1 i FGF9 z niższym powinowactwem i -20. Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad”