Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych ad 6

Każdy objaw kliniczny, obejmujący obrzęk spojówek, obrzęk powieki, zaczerwienienie spojówek i łzawienie, został zmniejszony przez leczenie przeciwciałem. (C) Częstotliwość degranulacji mastocytów po prowokacji alergenem również była znacznie zmniejszona (n = 12 na grupę, P <0,05). (D) Rekonspirację późną fazą komórek tucznych oceniono również u myszy WT i po MIP-1. blokada w 24 godziny po prowokacji. Rekrutacja komórek tucznych była znacząco hamowana przez leczenie przeciwciałem (n = 12 na grupę; P <0,05). Continue reading „Białko zapalne makrofagów 1 jako sygnał kostymulacyjny dla reakcji natychmiastowej nadwrażliwości z udziałem komórek tucznych ad 6”

Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy ad 8

Ekspresję białkową kinaz Src oznaczono ilościowo za pomocą analizy densytometrycznej z użyciem przyrządów ImagerMaster VDS (Amersham Pharmacia Biotech). IP i aktywność kinazy in vitro różnych kinaz Src. W celu przeanalizowania całkowitej aktywności komórkowej różnych kinaz Src, komórki (2 x 106 dla każdego oznaczenia) ponownie zawieszono i poddano lizie przez godzinę w 4 ° C w 450 ul buforu B zawierającego 20 mM Tris / HCl, pH 7,5, 10% glicerol, 1% Triton X-100, mM EDTA, 50 mM NaCl, mM ortowanadan sodu i koktajl inhibitora proteazy. Po odwirowaniu supernatanty inkubowano przez 2 godziny w temperaturze 4 ° C z odpowiednim przeciwciałem kinazy Src związanym z białkiem Aa-sefarozą. Immunokompleksy przemyto 3 razy przez odwirowanie i ponownie przeprowadzono w stan zawiesiny w buforze C (50 mM Tris / HCl, pH 7,5, zawierający koktajle fosfataz i inhibitorów proteazy). Continue reading „Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy ad 8”

Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy

Przewlekła białaczka limfocytowa z komórek B (B-CLL) jest chorobą nowotworową charakteryzującą się akumulacją limfocytów B z powodu niekontrolowanego wzrostu i odporności na apoptozę. Analiza komórek B świeżo izolowanych od 40 pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową wykazała, że kinaza Src Lyn, cząsteczka przełączająca, która łączy receptor komórki B z sygnalizacją w dół, wykazuje anomalne właściwości. Lyn wykazuje niezwykłą nadekspresję na poziomie białka w komórkach białaczkowych w porównaniu z normalnymi limfocytami B, z istotną podwielokrotnością kinazy anomalnie obecną w cytozolu. Podczas gdy w prawidłowych limfocytach B aktywacja Lyn jest zależna od stymulacji receptora limfocytów B, w spoczynkowych komórkach złośliwych, konstytutywna aktywność kinazy odpowiada za fosforylację tyrozyny o wysokim poziomie podstawowym i niską reakcję na ligację IgM. Dodanie inhibitorów Lyn PP2 i SU6656 do białkowych hodowli komórkowych przywraca apoptozę komórek, a leczenie złośliwych komórek lekami indukującymi apoptozę komórek zmniejsza zarówno aktywność, jak i ilość kinazy tyrozynowej. Continue reading „Przewlekłe limfocyty białaczkowe limfocyty B zawierają anormalną kinazę tyrozynową Lyn, przypuszczalnie przyczyniającą się do wadliwej apoptozy”

Hsp104 antagonizuje agregację a-synukleiny i zmniejsza degenerację dopaminergiczną w szczurzym modelu choroby Parkinsona cd

Ponieważ Hsp104 nie ma ogólnego działania przeciwapoptotycznego (np. W odpowiedzi na staurosporynę lub nadtlenek wodoru) po ekspresji w komórkach ssaków (43), jakiekolwiek zmniejszenie toksyczności prawdopodobnie będzie odzwierciedlać bezpośredni wpływ na nieprawidłowy fałdowanie (3-yynu. Następnie wykorzystaliśmy czyste białka do określenia, w jaki sposób Hsp104 moduluje agregację. Nasze badania podkreślają użyteczność terapeutyczną Hsp104 w chorobie neurodegeneracyjnej i dostarczają nowych informacji na temat kontrowersyjnych problemów związanych z tym, jak agregacja białek i tworzenie integracji przyczyniają się do patogenezy PD i innych chorób. Wyniki Hsp104 zmniejsza toksyczność indukowaną przez a-syninę. Continue reading „Hsp104 antagonizuje agregację a-synukleiny i zmniejsza degenerację dopaminergiczną w szczurzym modelu choroby Parkinsona cd”

Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby ad 6

Doprowadziło to do identyfikacji 3 kompozytowych modeli pochodzących z qPCR zawierających 2. 7 genów wykazujących niezwykłą dokładność przy rozróżnianiu TOL z próbek innych niż TOL zarówno w treningowych, jak i niezależnych zestawach do walidacji. Eksperymenty qPCR obejmowały dodatkową grupę próbek pobranych od zdrowych, nieprzyjmowanych osobników (CONT). Pozwoliło to na porównanie wzorców ekspresji TOL i CONT. Podczas gdy sygnatury ekspresji związane z tolerancją przypominały bardziej CONT niż wzory inne niż TOL, połowa genów wyrażona w różny sposób między próbami TOL i nie-TOL była również znacząco różna przy porównywaniu próbek TOL i CONT. Continue reading „Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby ad 6”

Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera ad 10

To stwierdzenie jest zgodne z naszą roboczą hipotezą, że umieszcza aktywację kalpainy w dół od A. wiąże się z komórkowymi celami i ostatecznie wpływa na fosforylację CREB (49). Chociaż nie wpływa to na całkowite A. poziomy, hamowanie kalpain może wywierać wartościowe działanie terapeutyczne w AD przez zablokowanie kaskad inicjowanych przez kalpain indukowanych przez oba A. i inne czynniki ryzyka AD, które zbiegają się na kalpach. Continue reading „Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera ad 10”

Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera

Kalpainy są zależnymi od wapnia enzymami, które określają los białek poprzez regulowaną aktywność proteolityczną. Kalpany zostały połączone z modulacją pamięci i są kluczem do patogenezy choroby Alzheimera (AD). Kiedy są nieprawidłowo aktywowane, kalpainki mogą również inicjować degradację białek niezbędnych do przeżycia neuronów. Tutaj pokazujemy, że inhibicja kalpainy poprzez E64, inhibitor proteazy cysteinowej i wysoce specyficzny inhibitor kalpainy BDA-410 przywraca prawidłową funkcję synaptyczną zarówno w hodowlach hipokampalnych, jak iw wycinkach hipokampalnych myszy APP / PS1, zwierzęcego modelu AD. Hamowanie Calpain poprawiło także przestrzenną pamięć roboczą i skojarzoną pamięć strachu u myszy APP / PS1. Continue reading „Hamowanie kalpain poprawia pamięć i transmisję synaptyczną w mysim modelu choroby Alzheimera”

ABCG1 i HDL chronią przed dysfunkcją śródbłonka u myszy karmionych dietą bogatą w cholesterol

Poziom HDL w osoczu jest odwrotnie proporcjonalny do częstości występowania choroby miażdżycowej. Niektóre z efektów ochronnych przed rozwojem oskrzeli HDL są prawdopodobnie pośredniczone poprzez zachowanie funkcji EC. Nie badano, czy korzystny wpływ HDL na EC zależy od jego wpływu na wypływ cholesterolu przez transportery kasety wiążącej ATP ABCA1 i ABCG1, które promują wypływ cholesterolu i oksysteroli z makrofagów. Aby rozwiązać ten problem, ocenialiśmy funkcję śródbłonka w Abca1 (3, Abcg1 (3 / I, i Abca1 (3 / Abcg1 (3). myszy karmione dietą wysokocholesterolową (HCD) lub dietą zachodnią (WTD). Continue reading „ABCG1 i HDL chronią przed dysfunkcją śródbłonka u myszy karmionych dietą bogatą w cholesterol”

Przeszczepienie komórek macierzystych nerki może poprawić fenotyp mysiego modelu rdzeniowego zaniku mięśni czesc 4

Neurony GFP + wykryto w przednim rogu rdzenia kręgowego, jak pokazano w przekrojach wieńcowych rdzenia kręgowego (A, rdzeń kręgowy szyjny, B, rdzeń kręgowy lędźwiowy). Immunohistochemia markerów neuroektodermalnych potwierdza, że komórki te są zróżnicowane na neurony. Mikroskopia konfokalna wykazała, że neurony pochodzące od dawcy GFP + współeksprymują białka swoiste dla neuronu, takie jak NeuN (C) i MAP2 (D). Komórki GFP + wykazują właściwości motoryczno-neuronowe, co wykazano przez dwukrotne barwienie immunofluorescencyjne GFP (zielone) pod wpływem promotora motoneuronalnego specyficznego dla HB9 i neuroprzekaźnika cholinergicznego (E, GFP; F, ChAT; G, łączenie). (H. Continue reading „Przeszczepienie komórek macierzystych nerki może poprawić fenotyp mysiego modelu rdzeniowego zaniku mięśni czesc 4”

System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 7

Co więcej, adhezja komórek śródbłonka do komórek mięśni gładkich, sądzona częściowo za pośrednictwem N-kadheryny, nie została zahamowana przez hamowanie FGF in vitro. Na koniec, podział podśródbłonkowy N-kadheryny pozostał niezmieniony w układzie naczyniowym eksponowanym na adenowirus sFGFR1IIIc (Suplementowa Figura 2B). Wiązanie VE-kadheryna / p120-katenina odgrywa ważną rolę w utrzymywaniu VE-kadheryny w kontaktach z komórkami i utrzymaniu integralności naczyniowej (27). Traktowanie FGF1 skutkowało zwiększeniem asocjacji VE-kadheryna / p120-katenina, co wykazano przez immunoprecypitację kadheryną VE, a następnie Western blotting z przeciwciałem anty-p120-katenina (Figura 9C). Przeciwnie, ekspresja konstruktu FGFR1DN doprowadziła do wyraźnego zmniejszenia asocjacji VE-kadheryna / p120-katenina, podczas gdy asocjacja VE-kadheryna / P-katenina nie została zakłócona (Figura 9D). Continue reading „System FGF odgrywa kluczową rolę w regulowaniu integralności naczyń ad 7”