Wykorzystanie profilowania transkrypcyjnego do opracowania testu diagnostycznego tolerancji operacyjnej u biorców przeszczepów wątroby ad 10

Wyniki oceny immunofenotypowania od wszystkich 57 biorców zastosowano do korelacji częstości podzbiorów PBMC z danymi ekspresji mikromacierzy. Przeciwciała monoklonalne fluorescencyjne Foxp3 zakupiono od eBioscience. Wszystkie pozostałe przeciwciała zakupiono od BD Biosciences. Eksperymenty sortowania krwi obwodowej. Pozytywna selekcja podzbiorów komórek T CD4 +, CD8 + i TCR + z PBMC izolowanych Ficoll została przeprowadzona z wykorzystaniem kulek magnetycznych Miltenyi zgodnie z instrukcjami producenta. Czystość posortowanych komórek była stale większa niż 90%. Całkowity RNA ekstrahowano z podzestawów komórek jednojądrzastych CD4 +, CD8 +,. TCR + i nie. T wykorzystując odczynnik TRIzol, a oznaczanie ilościowe ekspresji genu przeprowadzono stosując qPCR, jak opisano. Do tych eksperymentów wykorzystano próbki krwi obwodowej od 5 TOL i 5 pacjentów bez TOL. Statystyka. W celu porównania poziomów ekspresji genu qPCR i danych dotyczących immunofenotypii wykorzystano dwustronny test ucznia. Istotność statystyczną określono jako P <0,05. Materiały uzupełniające Zobacz Dodatkowe dane Podziękowania Niniejsza praca została wsparta grantami Ministerio de Educación y Ciencia, Hiszpania (SAF2004-00563 na A. Sánchez-Fueyo) oraz Ministerio de Sanidad / ISCIII, Hiszpania (PI050367 na M. Bruguera). CIBEREHD jest finansowany przez Instituto de Salud Carlos III (Hiszpania). Przypisy Niestandardowe skróty: CONT, kontrola zdrowych osób nie transplantowanych; FDR, stopa fałszywego wykrywania; MiPP, błędnie sklasyfikowany, ukarany algorytm prawdopodobieństwa tylnego; non-TOL, nietolerancyjny przeszczep wątroby (biorca); PAM, analiza predyktywna mikromacierzy; qPCR, ilościowy PCR w czasie rzeczywistym; SAM, znacząca analiza mikromacierzy; STA, stabilny przeszczep wątroby (biorca) w ramach podtrzymującej terapii immunosupresyjnej; TOL, tolerancyjny przeszczep wątroby (biorca). Konflikt interesów: Autorzy zadeklarowali brak konfliktu interesów. Informacje referencyjne: J. Clin. Invest.118: 2845. 2857 (2008). doi: 10.1172 / JCI35342 M. Martínez-Llordella i JJ Lozano w równym stopniu przyczynili się do tej pracy i są pierwszymi autorami. Zobacz powiązany artykuł na Znakowanie drogi do tolerancji przeszczepu. [przypisy: prostowanie keratynowe cennik, hydrominum skutki uboczne, balsam szostakowskiego zastosowanie ] [patrz też: femina kwidzyn, barwa siarkowa moc, womp zielona góra ]